Dans la présente étude, nous avons employé des techniques multiples pour comparer la distribution sous-cellulaire de deux
enzymes, 5-LO et l'hydrolasede LTA 4, qui fonctionnent séquentiellement synthétisent
LTB4 d'acide arachidonique. Nous avons prouvé pour la première fois que l'hydrolasede LTA
4 peut être trouvée au noyau, où elle Co-localise avec 5-LO en reposant des cellules
d'AMs et de RBL. Dans les deux types de cellules, peu de quantités d'hydrolasede LTA 4
et 5-LO étaient également présents dans le cytoplasme. Nous également avons constaté que l'hydrolasede
LTA 4 Co-localise avec 5-LO dans le cytoplasme du sang périphérique PMNs. Cependant, ce type
de cellules, l'hydrolasede LTA 4 n'entre pas dans le noyau avec 5-LO après adhérence
ou recrutement de ces cellules. En conclusion, nous avons démontré que, à la différence de 5-LO, l'hydrolasede
LTA 4 ne montre pas l'association ou la translocation calcium-dépendante de membrane après stimulation
de cellules.
La constatation que l'hydrolasede LTA 4 peut s'accumuler au noyau d'AMs et des cellules
de RBL étonne en particulier, puisque la pensée courante est que cette enzyme est exclusivement cytoplasmique.
En effet, la caractérisation courante pour cette protéine à la banque de données de Suisse-Prot donne
sa distribution sous-cellulaire comme "cytoplasmique." Conformé à ces cellules de caractérisation, épithéliales
et mesenchymal dans les figues. 5 et 9 manquent de la souillure nucléaire pour l'hydrolasede LTA 4. Ceci suggère que seulement
certains types de cellules puissent montrer l'importation nucléaire de l'hydrolasede LTA
4.
L'importation nucléaire de petites molécules peut procéder par diffusion, tandis que nucléaire importent de plus grandes
molécules, comme l'hydrolase de 69-kDaLTA 4, exige la présence d'un ordre nucléaire
d'importation, qui se compose typiquement d'un faisceau des acides aminés de base (32). Pas étonnamment, l'hydrolasede LTA 4 a plusieurs tels faisceaux, le plus
notamment (humain) à 186RKIYK. Intéressant, un des domaines structuraux de l'hydrolasede LTA 4,
remarquables par Haeggstrom et collègues (33), répétitions de tatou de dispositifs. Ces éléments structuraux sont également trouvés sur les protéines nucléaires
d'importin d'importer-médiation, suggérant la possibilité que l'hydrolasede LTA 4 pourrait
à la place directement agir l'un sur l'autre avec le complexe nucléaire d'importin- ou de pore. L'activation d'un ordre nucléaire d'importation implique typiquement une étape
de phosphorylation (34) comme deuxième condition pour l'importation nucléaire. Bien qu' évidemment l'hydrolasede LTA
4 puisse être phosphorylée à la sérine 415 (35), elle est peu claire si cet événement spécifique de phosphorylation ait n'importe quel effet sur la distribution
sous-cellulaire. Clairement, beaucoup de travail est nécessaire pour comprendre mieux le mécanisme de l'importation
nucléaire de l'hydrolasede LTA 4.
Le règlement de la distribution sous-cellulaire de l'hydrolasede LTA 4 peut être important
de beaucoup de manières. Le plus évidemment, il peut affecter la synthèsede LTB 4.
Les cellules d'AMs et de RBL, qui Co-localisent 5-LO avec de l'hydrolasede LTA 4,
métabolisent efficacement LTA4 à LTB4, comme indiqué par leur capacité de sécréter de grandes
quantités de LTB4 avec des quantités négligeables de LTA4. En revanche, PMNs, qui peut aisément
isoler 5-LO de l'hydrolasede LTA 4, sécrètent des quantités significatives de LTA4
aussi bien que LTB4 (36). Il est possible qu'une partie de l'explication pour la conversion inefficace de LTA4 à LTB4
dans PMNs se situe dans la séparation spatiale de l'hydrolase de 5-LO etde LTA 4.
Un autre rôle intrigant pour l'importation nucléaire de l'hydrolasede LTA 4 peut se relier
à régler les niveaux de LTA4 dans le noyau. Puisque 5-LO peut s'accumuler au noyau, les quantités
significatives de son produit final, LTA4, seront produites dans ce compartiment. LTA4
a apparemment une capacité saisissante de lier aux constituants d'ADN (37). Ceci alternativement peut avoir le potentiel d'affecter des événements de transcriptional. En facilitant la
conversion de LTA4 à LTB4, la Co-localisation de l'hydrolasede LTA 4
avec 5-LO au noyau pourrait ramener la quantité de LTA intranucléaire4 disponible au grippage
à l'ADN.
En conclusion, l'importation nucléaire de l'hydrolasede LTA 4 pourrait être appropriée à la
fonction d'aminopeptidase de cette enzyme. Bien que les souris qui étaient déficientes pour l'hydrolasede
LTA 4 n'aient indiqué aucune évidence pour un rôle d'aminopeptidase pour l'enzyme (38), il est possible qu' une telle fonction devienne seulement évidente quand l'enzyme est dans un lieu
sous-cellulaire particulier. Cette possibilité exigera la recherche additionnelle.
En résumé, nous avons prouvé que l'hydrolasede LTA 4 peut résider, avec 5-LO, dans le nuclóplasme
des cellules d'AMs et de RBL. D'ailleurs, l'importation de l'hydrolasede LTA 4 dans
le noyau ne coïncide pas nécessairement avec celle de 5-LO, comme peut être vu dans PMNs adhérent et recruté.
Ces résultats indiquent que l'importation nucléaire de l'hydrolasede LTA 4 est un événement
réglé qui se produit seulement dans quelques types de cellules dans des conditions spécifiques. L'hydrolasede
LTA 4 omniprésent est aussi bien exprimée en types non-non-leukocytic de cellules, et son importation
dans de tels types de cellules reste à évaluer. En outre, le manque de régler correctement la distribution
sous-cellulaire de l'hydrolasede LTA 4 peut jouer un rôle dans la maladie. Ces possibilités
seront le sujet de futures investigations.